遗传扩展试验又称PCR试验,其特点是可以大大提高微量DNA,PCR是分子生物学研究和试验的常规方法,广泛应用于生物学的各个领域。如:艾滋病检测,乙型肝炎,禽疫病,癌基因检测和诊断,DNA指纹,个人识别,亲子鉴定,法医物证,动植物检疫,动物及其衍生物检测,动物饲料,化妆品,食品卫生检测,转基因作物和转基因微生物检测等。
,PCR实验室装修布局。
原则上,PCR实验室布局为试剂准备区、样品制取区、增加区和增加产品定位区四个独立的工作区,并设立常用走廊,各工作区应设立缓冲间,工作区和缓冲间应设立连锁装置。各种功能的工作范围应分开独立,各工作范围有明显的标志,不能直通,如紧密连接,则需安装物品传递窗。前两个范围为增加前区,后两个范围为增加后区,增加前范围和增加后范围应严格分开。试验材料、试剂、记录纸、笔、清洁材料等,只能从增加前区流向增加后区,即从试剂准备区样品制取区增加产品定位区,不能逆向流动。试验室的气流也要从增加前区流向增加后区,不能逆向流动。每个工作区顶部应安装紫外灯,其波长为254nm,每20㎡一支40W的紫外灯。
第二,实验室各范围的功能及主要设备。
试剂准备区:主要用于试剂的制取、分装和主反应混合液的制取。试剂和样品制成的材料应直接运输到该范围,不得通过其他范围。试剂原料必须储存在该范围,并在该范围制成所需的试剂。该范围的主要设备包括天平、冰箱、离心机、取样器、振荡器等。
本区对气流压力的控制没有严格的要求。
样品制取范围:主要用于样品的保存,核酸(RNA,DNA)的提取,储存,以及与增加反应管的合成,以及DNA的测定。该地区的主要设备有冰箱,生物安全柜,离心机,样品,振荡器,恒温水浴等。
该范围的渗透压力要求为:与邻近范围相比,为避免从邻近范围进入该范围的气溶胶污染。
增加区:主要用于DNA增加。另外,已经制取好的DNA模板(样品制取区)的加入和主反应混合物(样品制取区)也可以制取成反应混合物等。该范围的主要设备有:增加器,冰箱,离心机,样品加工器等。
该范围的渗透压力要求为:与邻近范围相比,为避免气溶胶从该范围泄漏。
增加产品定位范围:增加产品的测定。该范围的主要设备有酶标仪,洗板机,取样器,浴缸等。
地区渗透压力的要求是:与邻近地区相比,为了避免增加产品从地区扩散到其他地区。
第三,PCR实验室通风系统及压力控制系统。
各范围之间应有单边实验过程流、物流、人流和气流,形成单边过程的保护屏障,避免实验间相互干扰,防止气溶胶扩散污染实验过程。
PCR实验室没有严格的净化要求,但为了避免各实验范围交叉污染的可能性,应选用全排气流组织方式,严格控制输送和排气比例,保证各实验区的压力要求。
第四,PCR实验室装修。
实验室围护结构应牢固,气密性好。所有阴阳角应选用弧形过渡,墙体内壁应光滑、无灰尘、耐腐蚀、易于清洗和消毒。地面选用聚氯乙烯卷材或环氧树脂自流平,材料应满足无缝、无泄漏、光滑、耐腐蚀的要求。
第五,PCR实验室的注意事项。
几个范围的尺寸设置情况,试剂准备区,增加区,增加产品定位区,空间可以相对较小,样品制取区应放置生物安全柜和低温冰箱,空间应较大。
2.在试剂准备区和样品制取区设置紧急洗眼器,确保操作人员的安全。
PCR实验室无严格的净化要求,可根据用户使用情况及资金投入进行选择。